在第334话中，佐助认为大蛇丸已经交给他不少东西，已经没什么用了，决定杀掉大蛇丸以免后患。
当时大蛇丸的身体越来越糟了，回忆起三年前中忍考试中的点点滴滴，大蛇丸对佐助的成长赞不绝口。转生的时刻再次到来，大蛇丸早已对佐助的身体垂涎三尺了，考虑到即将得到佐助，大蛇丸乐的合不拢嘴。但是佐助是不会给大蛇丸得到自己的机会，他突然出现在大蛇丸的门外，毫不客气的对大蛇丸发起攻击，声称大蛇丸已经没有什么可以教自己的，并且自己可以对大蛇丸无情，佐助隐藏多年的实力终于要爆发了。
大蛇丸的真身，白磷大蛇终于出现了，这条大蛇身上的每一片鳞片都是一条白色小蛇，这些蛇不断的袭击佐助，佐助开启了咒印的力量，将无数条小蛇一一斩杀，在佐助面前，曾经羞辱过自己的大蛇丸现在简直不堪一击。他却讽刺地在自己进行转生的结界内，被佐助吸收及夺去一切力量，留下一副大蛇躯壳。结果因身体极其虚弱，不敌佐助的写轮眼而被佐助吸收，灵魂与力量被完全压制。
大蛇丸曾一度因研究转生之术被发现，企图占有鼬的身体失败，这些经历迫使他不得不选择对还是雏鸟的佐助动手，结果身为雏鸟的佐助如今终于成为一只猎鹰，开始了他的复仇之路。